

产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 真菌核糖体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速从各种真菌细胞和各种真菌组织样本中提取得到真菌核糖体。
本试剂盒适用于提取新鲜真菌样本的核糖体,用于冻存样本的提取时核糖体回收率较低。
贝博® BBproExtra® 核糖体提取试剂盒提取的核糖体具有生物活性,可以用于核糖体功能研究、核糖体蛋白提取等各种下游应用。
本试剂盒采用非酶法的快速提取方法,可以在一小时内快速提取得到核糖体,但是回收率比酶法核糖体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的试剂盒(相关产品BB-36623),酶法提取得到的核糖体回收率会有增加,但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。
贝博® BBproExtra® 可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
有效期
一年
适用样本
真菌
仪器准备
1. 离心机
2. 振荡器
3. 匀浆机/匀浆器
4. 涡旋混匀器
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒
2. 振荡器
3. 匀浆机/匀浆器
4. 涡旋混匀器
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液
2. 蛋白定量试剂盒
2. 蛋白定量试剂盒
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 细胞筛(100 μm)
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 细胞筛(100 μm)
使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
1. 取200 mg左右(200 mg-500 mg均可)的新鲜真菌组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入2 ml 试剂A,用匀浆机/匀浆器/组织搅碎机充分匀浆。
3. 将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。
4. 将滤液在500×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
5. 将上清在1000×g条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。
6. 在上清中加入0.5 ml提取液B,充分混匀。
7. 置振荡器振荡20分钟。
8. 在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
9. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
10. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
11. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
12. 弃上清,沉淀即为核糖体。
13. 用400 μl核糖体保存液C或其他相应的缓冲液重悬核糖体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
1. 取200 mg左右(200 mg-500 mg均可)的新鲜真菌组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入2 ml 试剂A,用匀浆机/匀浆器/组织搅碎机充分匀浆。
3. 将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。
4. 将滤液在500×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
5. 将上清在1000×g条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。
6. 在上清中加入0.5 ml提取液B,充分混匀。
7. 置振荡器振荡20分钟。
8. 在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
9. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
10. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
11. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
12. 弃上清,沉淀即为核糖体。
13. 用400 μl核糖体保存液C或其他相应的缓冲液重悬核糖体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
提取的核糖体纯度为多少?
本试剂盒提取得到的核糖体样本纯度大约85%。
不建议用于蛋白质定位等方面的下游应用。
本试剂盒提取得到的核糖体样本纯度大约85%。
不建议用于蛋白质定位等方面的下游应用。
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